一、CRISPR 基因编辑技术介绍与选择 |
基因编辑技术背景介绍 (ZFN,TALEN,CRISPR) |
CRISPR/CAS9技术系统介绍 1. 特点①基本要素;②基本步骤;③如何应用;④识别模式;⑤分子本质。 2. 技术原理 与RNAi技术的比较 3. 系统优点 |
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CRISPR/CAS9系统的选择 1.野生型Cas系统 2.CETCh-seq 3.eSpCas9 4.spCas9-HF1 5.Cas9 nickase 6.dCas9FokI 7.dCas9KRAB 8.dCas9VP64 9.dCas9-SAM 10.CRISPRainbow 11.dCas9-enChIP |
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二、CRISPR基因编辑技术设计与效果鉴定 |
gRNA设计 1.gRNA设计:特点、设计原则 2.设计前的准备:序列、位置 3.手工法 4.软件法 |
载体构建 1.载体的选择 2.载体的酶切 3.oligo合成 4.退火、连接、转化 5.挑克隆、培养、验证 |
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基因组编辑效果的鉴定 1.基因组DNA抽提 2.PCR 3.酶切鉴定 4.单克隆细胞筛选 5.单克隆鉴定 |
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三、CRISPR基因编辑技术应用 |
基因敲除 大片段删除 基因敲入 转录激活 转录抑制 甲基化研究 乙酰化研究 位点标记 单基因编辑 |
CRISPR建模 1.动物模型 2.疾病模型 |
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CRISPR筛选 1.疾病筛选 2.药物靶点筛选 |
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新基因功能鉴定 | |
其他CRISPR蛋白的应用 | |
四、SCI文章写作与投稿 |
1.SCI的写作 1)Backgroud/Introduction的写法(5个要素,4个起伏) 2)Methods的写法(1句话) 3)Results的写法(4句套话) 4)Discussion的写法(7个层次) 2.文章的选题 立题前需要考虑的几个问题 3.投稿建议 1)4个忠告 2)5个档次 |
五、辅助课程 |
1.学后交流、微信群、QQ群建立; 2.咨询、合作。专业技术团队深入探讨。 |